Triagem de ligantes da proteína capsídica da dengue sorotipo 2 por ressonância magnética nuclear

Abstract

A dengue é a doença arboviral mais significativa do mundo que atinge países tropicais e subtropicais onde as condições do meio ambiente favorecem o desenvolvimento e a proliferação do mosquito, Aedes aegypti, principal vetor da doença. Atualmente, não existe nenhuma terapia antiviral disponível para o tratamento dessa doença e a epidemia provoca altos custos de serviços de saúde para os países afetados. A proteína capsídica do vírus da dengue é reconhecida como alvo de grande interesse para o planejamento de antivirais, devido ao seu papel fundamental no recrutamento do RNA durante a montagem da partícula viral, assim como a liberação do genoma durante a infecção. Neste contexto, este trabalho buscou identificar compostos bioativos com potencial inibidor da proteína capsídica da dengue 2 (DENVC2) por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e fluorescência. Após a expressão e purificação da DENVC2, dezoito compostos das classes guanilhidrazonas e oximas foram testados com a proteína por RMN. As interações entre a proteína e os ligantes foram mapeadas por meio dos experimentos STD, T1, T2 e DOSY, e cinco compostos foram identificados como potenciais inibidores da DENVC2. Estudos de fluorescência intrínseca confirmaram a interação dos ligantes com a DENVC2 e sugerem que há uma mudança conformacional na proteína. Sendo assim, o sítio de ligação da macromolécula foi mapeado por HSQC 1H15N. Os resultados das propriedades farmacocinéticas calculadas in silico mostram que todos os cinco compostos são promissores para administração oral.